Celigo全視野細(xì)胞掃描分析儀系統(tǒng)配備高質(zhì)量的明場(chǎng)通道和多這四個(gè)熒光通道,可提供高通量、全孔成像和定量數(shù)據(jù)分析,用于多種細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)。Celigo全視野掃描分析儀常用于研究貼壁和懸浮細(xì)胞、3D腫瘤球、iPSC克隆和腫瘤干細(xì)胞克隆,Celigo兼容各種微孔板(從6孔到1536孔)和T培養(yǎng)瓶。
軟件以工作流程為基礎(chǔ),具有直觀的界面,可同時(shí)成像和分析;提供動(dòng)態(tài)分析,例如多時(shí)間點(diǎn)拍攝生長(zhǎng)追蹤,細(xì)胞群進(jìn)行類流式設(shè)門分析和細(xì)胞群統(tǒng)計(jì)報(bào)告。可用彩色疊加圖顯示特定細(xì)胞群的細(xì)胞圖像。
Celigo可進(jìn)行高速全自動(dòng)化的成像,并可在復(fù)雜的樣本類型申對(duì)多種細(xì)胞類型進(jìn)行量化分析。同時(shí) 提供了豐富的應(yīng)用程序選項(xiàng),包括無標(biāo)記細(xì)胞計(jì)數(shù)、基于融合率的細(xì)胞生長(zhǎng)追蹤、殺傷實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期分析、細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn),以及其他細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分析(包括受體內(nèi)吞蛋白表達(dá)和檢測(cè)、磷酸化和吞噬作用)。
光學(xué)透鏡:全孔成像,每成像一次孔僅位移一次。
明場(chǎng):提高孔邊緣的明場(chǎng)光學(xué)圖像對(duì)比度,消除孔邊緣的光學(xué)失真,精確識(shí)別孔里的每個(gè)細(xì)胞。
圖像圈定:明場(chǎng)和熒光算法,可精確圈定貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞。
對(duì)每個(gè)孔中的每個(gè)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù):獲取高分辨率的全孔圖像(在明場(chǎng)和熒光通道中),并對(duì)每個(gè)孔中的每個(gè)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。
自動(dòng)保存高分辨率圖像:使用Celigo圖像可對(duì)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證,所有孔的圖像均會(huì)自動(dòng)保存。
腫瘤細(xì)胞殺傷動(dòng)態(tài)檢測(cè):在使用Calcein AM進(jìn)行無損、動(dòng)態(tài)實(shí)驗(yàn)的過程中,我們?cè)诘?小時(shí)和第6小時(shí)獲取同-96孔板(顯示于下側(cè))的圖像。Celigo圖像證實(shí):在同一孔中,Calcein AM陽(yáng)性活腫瘤細(xì)胞的數(shù)量從11,381減少到1,635。
NK細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性對(duì)靶細(xì)胞的影響
對(duì)calcein AM陽(yáng)性活細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),以測(cè)定共培養(yǎng)細(xì)胞中雙功能融合蛋白(M7824)對(duì)NK細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性的影響。
使用TGF-B1和IFN-Y對(duì)靶細(xì)胞A549進(jìn)行預(yù)處理,使用calcein AM(CAM) 進(jìn)行染色。將NK細(xì)胞從PBMCS中分離出來,與A549細(xì)胞共培養(yǎng)。
在復(fù)雜的共培養(yǎng)體系中追蹤雙特異抗體誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性
Celigo對(duì)胎兒細(xì)胞(CellTrackerGreen染色)和HER2敲除細(xì)胞(CellTracker Violet染色)的共同培養(yǎng)體系進(jìn)行直接計(jì)數(shù)。該實(shí)驗(yàn)研究了單價(jià)雙特異lgG(DuetMab)對(duì)胎兒細(xì)胞和HER2敲除細(xì)胞共培養(yǎng)體系的選擇性細(xì)胞毒性作用。
l對(duì)懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞基于transwell實(shí)驗(yàn)的趨化作用、細(xì)胞侵襲和細(xì)胞遷移進(jìn)行成像和定量。
小室(A)內(nèi)的懸浮細(xì)胞穿過多孔膜,朝著孔板下層的化學(xué)誘導(dǎo)物遷移。包被了ECM的小室(C)上的貼壁細(xì)胞侵襲并遷移到膜的另一側(cè)。Celigo可自動(dòng)對(duì)遷移的懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞(B、D)進(jìn)行成像和計(jì)數(shù)。
劃痕實(shí)驗(yàn):成像和定量
在多個(gè)時(shí)間點(diǎn),對(duì)整個(gè)孔進(jìn)行成像。成像的同時(shí),軟件會(huì)自動(dòng)計(jì)算每個(gè)孔中的細(xì)胞融合率。
采用直接細(xì)胞計(jì)數(shù)法,監(jiān)測(cè)生長(zhǎng)抑制情況
劑量依賴型生長(zhǎng)抑制
生成的圖像(顯示于左側(cè))來自兩個(gè)孔:B2和B10;之后分別按照33.3um和0.005um的劑量對(duì)兩個(gè)孔進(jìn)行藥物處理。